Os doze signos do horóscopo estão presentes no quadro.

Leonardo Da Vinci apresenta-nos todo o seu conhecimento de Astrologia e Psicologia no seu quadro "A Última Ceia", mostrando como era profundo o seu conhecimento oculto. Tudo no quadro "A Última Ceia" é simbologia, não somente da Astrologia, mas também da Numerologia.

Na pintura, os 12 apóstolos correspondem aos 12 signos do zodíaco. Se olhamos para o zodíaco, podemos entender que ele é feito de 12 princípios básicos formado por seis eixos, a saber: os eixos Áries/Libra, Touro/Escorpião, Gêmeos/Sagitário, Câncer/Capricórnio, Leão/Aquário e Virgem/Peixes.

Estes eixos apresentam-nos a harmonia que precisamos de encontrar para conquistar o equilíbrio tão almejado na vida. Como explica Emma de Mascheville, uma grande astróloga alemã que passou por nós, "as linhas diagonais no quadro 'A Última Ceia' cruzam-se no coração de Cristo. O centro do círculo do arco da porta está na testa de Cristo, e isso representa a luz no mundo, a unidade e a fonte da vida rodeada dos doze tipos humanos, sendo cada apóstolo um receptor das doze forças básicas originadas pela trindade da luz e o seu espectro, que formam os doze pólos e os seus eixos.

Primeiro eixo: Áries/Libra
Segundo eixo: Touro/Escorpião
Terceiro eixo: Gêmeos/Sagitário
Quarto eixo: Câncer/Capricórnio
Quinto eixo: Leão/Aquário
Sexto eixo: Virgem/Peixes
CARNEIRO
Carneiro, no quadro, é representado por Simão, o líder que usa a energia, a força, a iniciativa, a decisão e a luta. Ele está sentado na ponta da mesa gesticulando com agressividade. Pessoas deste signo usam armas para solucionar seus problemas e acabam aprendendo, conforme amadurecem, que não podem agir cegamente, sem medir as consequências de seus actos. E que o seu desejo, o seu impulso e sua verdade precisam de ser ponderados. Carneiro gosta de impor, mas precisa de aprender a ceder. Carneiro é o homem e a sua independência, é a acção do "eu".
BALANÇA 
Balança, ao contrario de Carneiro, precisa aprender a impor-se e a agir. Balança é simbolizada por São João e nos mostra a beleza, a harmonia: é o que medita e mede. Ele é o que colabora, o que coordena. Na pintura, ele está com a cabeça inclinada para evitar o impacto da energia de Carneiro. Diferente de Carneiro, ele considera o "eu" e o "tu". Balança é a humanidade, a colectividade e a justiça. Balança é a consciência do "tu". Toda a procura de harmonia e justiça de Balança torna-se desequilíbrio e aniquilação quando não há energia e acção.
TOURO
Touro, é um signo de matéria, é simbolizado por Judas Tadeu, regido pelas glândulas. Signo da realização, da obediência, da formação da matéria através do desejo. Mas também da consciência do desejo para não se tornar escravo da matéria, pois de nada adianta ter a matéria e não utilizá-la e transformá-la. Touro é dedicado, extremamente carinhoso, mas precisa aprender a dominar os seus desejos. Touro aceita e executa, protege e mantém. Porém, também sabe ter autoridade e sangue frio. Deve aprender a autoridade sobre seus desejos e sobre as suas realizações, e procurar uma organização consciente para não sucumbir e fracassar diante das exigências da vida.
ESCORPIÃO
Escorpião é o signo da autoridade, da organização, da força criadora. É regido pelos órgãos genitais e simbolizado por Judas Escariotes. Este é o signo da morte, da destruição da matéria para a transformação e libertação do espírito. Quem conseguir entender Judas Escariotes de Leonardo da Vinci perderá a má impressão que esse signo muitas vezes deixa, pois este signo tem uma grande função em nossas vidas. Judas Escariotes era o organizador na comunidade dos apóstolos. Todo escorpiano possui grande capacidade de administração. Ele foi político e reconhecia o poder de Cristo como o grande libertador. Escorpião precisa aprender a brandura, a doçura e o amor, mas um amor sem raiva e ódio.
 GÉMEOS
Gêmeos carrega em si a esquerda e a direita, as leis que regem o movimento e a formação do intelecto através das informações do meio. Adapta-se facilmente às circunstâncias, tem o dom da palavra e da comunicação. Da Vinci mostra-nos, na figura de São Mateus, os gestos e as expressões típicas de um geminiano. O terceiro na ordem dos apóstolos, o repórter da vida de Cristo, o que tudo viu e conviveu. Gêmeos quer falar para todas as direcções ao mesmo tempo. Pessoas deste signo precisam criar paralelas, não dispersar o que aprendem com facilidade, mas pensar e criar a meta e o alvo a ser atingido. Gêmeos é a inteligência e precisa fixar o pensamento para um alvo.

SAGITÁRIO
Sagitário, simbolizado por São Pedro (ou Simão Pedro, de acordo com a Bíblia), rege as coxas e a circulação. É o nono signo, simbolizado pelo Centauro, expressa a lei da evolução. Sagitário representa a lei, o dogma, a religião e a filosofia. Sagitário possui o pensamento fixo no alto, no Universo, em Deus. São Pedro, com a faca na mão direita, simboliza também a fera, o animal que habita o homem. A parte superior mostra o homem que olha para frente, que busca o avanço, com o dedo apontado para o Divino. É o animal humano em busca de Deus. Sagitário atinge o alvo pelos movimentos da vida. Os seus ideais são altos, morais e elevados. Pelas quedas, o entusiasta dogmático e defensor das leis torna-se o filósofo realizado internamente. Sagitário é a força espiritual.
CARANGUEJO
Caranguejo representa a sensibilidade, a visão do amanhã e a conservação emocional do que se foi. Com os seus passos para frente e para trás representa também e fé e a gratidão. Na obra de Da Vinci, é representado por Filipe, que foi encantado pela visão em Cristo. Fisicamente, tem o rosto cheio e as mãos macias, expressando o "vem a mim". Representa a sensibilidade e a emotividade, e precisa aprender a confiança em si, nas suas escolhas e nos seus próprios pés. Deve usar a sua intuição e visão no caminhar seguro de cada dia, realizando a própria esperança.


CAPRICORNIO

Capricórnio é a cabra montanhesa, a expressão da segurança e da prudência, da concentração e da capacidade de subir a montanha passo a passo. Simbolizado por André, é a razão, a confiança e o raciocínio. É o homem compromissado e assustado pelo dever, pela responsabilidade e pela preocupação de ter calculado e raciocinado com certeza. É a representação da confiança no hoje. Deve aprender a suavidade, a fé e a certeza de que o caminho amanhã será tão seguro como o de hoje.

LEÃO

Leão significa o Rei, o centro e o governo. Aquele que exerce o magnetismo e a disciplina. Leão é a atracção, o coração, a força solar atractiva. Simbolizado por Tiago Maior, mostra no seu gesto com os braços abertos a certeza de que Leão abraça tudo o que está em seu entorno, mas sempre visando o seu próprio coração, o ponto central. O leonino é leal, confia no seu próprio poder, na sua força e na sua alegria pela vida e disciplina. Leão é a vontade tempestuosa de sacudir e renovar em direcção ao progresso, limitado pela lei da ordem e consciente do processo evolutivo.

AQUÁRIO
Aquário traz o pioneirismo nas suas raízes mais profundas, simbolizado por Tiago Menor. Os aquarianos são os precursores de movimentos sociais. São originais, buscam a liberdade o tempo todo, não têm preconceitos, são dinâmicos, decididos e altruístas. O sentido de fraternidade está arraigado nos seus corações. Mas existe um outro lado em aquário: pode ser introvertido e pessimista, pois falta-lhe a certeza do êxito e a confiança no próprio poder. Na obra de Da Vinci, a mão estendida a Pedro expressa a inquietude aquariana. Os aquarianos podem até perguntar, mas acabam por fazer tudo à sua própria maneira. Aquário precisa aprender que é um rei, mas que, para sê-lo inteiramente, precisa disciplinar sua liberdade.

VIRGEM
Virgem está simbolizado na obra de Da Vinci por Tomé, sentado à direita de Jesus. Tomé procura a sabedoria, a natureza constante do movimento. Virgem é a variação da forma, a vida manifestada, o observar e o aperfeiçoar. Tomé traz a ansiedade e a inquietação no seu rosto, quer aprender e entender tudo o que vê, analisando as minúcias, os detalhes e os defeitos. Aponta e critica o erro com os dedos. Virgem precisa aprender a colocar-se no papel do outro, sentir suas dores, para não julgar e não inquietar-se pela aparente imperfeição. Precisa, na verdade, entender o que está por trás de cada coisa e compreendê-las com amor – mesmo os erros devem ser compreendidos com amor.

PEIXES
Peixes está simbolizado por Bartolomeu, no fim da mesa. Ele traz em si um radar que o faz sentir a perfeição. No momento em que não existem palavras para explicar tudo o que sentimos, mas somente símbolos, chegamos a Peixes. Bartolomeu tem seus pés situados na luz. Possui em si a calma, a visão ampla de toda a confusão da mesa, e procura sentir, imaginar e penetrar pacificamente na razão que leva cada um a agir desta ou daquela maneira. Consegue afastar-se da dor e da ansiedade do momento e coloca-se na luz. Peixes deve aprender que não deve fugir para o que não é real, para sua imaginação. Se está com os pés na terra, é nela que deve deixar a marca de sua obra e aceitar o que fere a própria sensibilidade.